軟瓊脂克?。嚎寺⌒纬陕史从臣毎后w依賴性和增殖能力兩個重要性狀

實驗步驟

1.獲取樣本，培養細胞。

2.調整細胞懸液密度為1×103個/ml細胞。 

3.制備底層瓊脂，完全溶化的5%瓊脂和 37℃ 左右預溫的新鮮完全培養液以1：9比例在 40℃ 均勻混合，加入培養皿（直 徑 60mm ）中，每皿含0.5%瓊脂培養基2ml，室溫下瓊脂完全凝固。 

4.制備上層瓊脂,37℃ 密度每皿含200個的細胞懸液1.5ml移入小燒杯中，加入 40℃ 、5%瓊脂等體積混勻，即成0.25%半固體瓊脂培養基。配好的半固體瓊脂培養基立即加入鋪有底層瓊脂的培養皿中，室溫下瓊脂凝固。 37℃ 、5%CO2靜置培養2- 3周。 

5. 當培養皿中出現肉眼可見克隆時，終止培養，棄去培養液，PBS液小心浸洗2次，空氣干燥。甲醇固定15分鐘，棄甲醇后空氣干燥。用Giemsa染液染色10分鐘，流水緩慢洗去染液，空氣干燥。 

結果展示

實驗周期及交付標準 

1. 實驗周期：1-2周

2. 交付標準：克隆形成圖片、計數結果、柱狀圖、實驗報告（實驗步驟、試劑、儀器等）

細胞克隆化其他方法 

1. 稀釋鋪板方法

2. 飼養層克隆法

3. 毛細管克隆法

4. 熒光激活分選法

細胞克隆 集落形成法/稀釋鋪板方法

軟瓊脂克隆法 

毛細管克隆法 

收費標準/服務周期/提供結果： 

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