鮑曼不動桿菌(Acinetobacter baumannii)是需氧的不發酵糖革蘭陰性桿菌, 屬條件致病菌, 主要引起 醫 院 獲 得 性 肺 炎, 尤 其 是 呼 吸 機 相 關 性 肺 炎( VAP ), 亦可引 起 血流感染、 腦膜炎、 腹膜炎、 傷口感染等多種感染 。
小鼠氣管插管操作步驟 : 建立在耳窺鏡直視下 小鼠氣管插管方法。
具體步驟如下:
1、采用1.25%2,2,2 三溴乙醇(25mg/kg)腹腔注射, 待小鼠麻醉后仰臥位固定小鼠 于嚙齒動物工作臺 上。
2、采用門齒環一端鉤住小鼠門齒, 另 一端固定于操作臺, 緩慢傾斜工作臺至45°。
3、操作者右手持直頭鑷牽拉小鼠舌頭, 左手持帶電池手柄的耳窺鏡, 耳窺鏡尖端深入小鼠舌上, 透過耳 窺鏡的放大鏡, 操作者可觀察到小鼠的聲門 隨呼吸而開啟 、閉合。 在小鼠聲門開啟的瞬間, 操作者迅速 將已安裝氣管插管的氣管內 導管插入氣道, 并退出導管。 將喉鏡緊貼氣管插管口 , 若喉鏡表面有霧氣形 成表明插管成功。
注射菌液 :
氣管插管成功后, 沿氣管插管注射10μL鮑曼不動桿菌菌液, 吹打3次, 確保菌液全部進入小鼠肺 部。 小鼠在嚙齒動物操作臺豎立1min后, 緩慢放平操作臺, 將小鼠放回飼養籠中。
肺組織細菌定量:
待麻醉小鼠全部蘇醒,頸椎脫臼 法處死小鼠,無菌操作取出小鼠兩肺,稱重后每0.1g肺加入0.9mL生理鹽水,組織勻漿機研磨,取100uL經系列稀釋后接種于LB培養基培養16h后行菌落計數,繼而計算出每克肺組織的細菌含量。