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普魯士藍染色

普魯士藍染色簡介: 

Perls普魯士藍反應(Prussian blue reaction)又稱為含鐵血黃素染色,即經過亞鐵青化鉀和稀酸處理后可以產生藍色,常見于吞 噬細胞內或間質內,主要顯示三價鐵鹽。其染色原理為:三價鐵離子被從蛋白質中被稀鹽酸分離出來,生成不溶解的藍色化 合物,即普魯士藍。 

普魯士藍染色實驗意義: 

Perls普魯士藍是非常經典的組織化學反應,是顯示組織內三價鐵的一種敏感、傳統優良的方法。 

實驗步驟: 

(1)石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯I 20min-二甲苯II 20min-無水乙醇I 5min-無水乙醇II 5min-75%酒精5min,自 來水洗,蒸餾水洗3遍。 

(2)普魯士藍染色:將亞鐵青化鉀溶液和鹽酸溶液等比例混合成普魯士藍染液,切片入染液中染色1h,蒸餾水洗2遍。 

(3)核固紅染色:核固紅染液染色1-5min,流水沖洗。 

(4)切片依次放入無水乙醇I 5min-無水乙醇II 5min-無水乙醇III 5min-二甲苯I 5min-二甲苯II5min透明,中性樹膠封片。 

(5)顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。

實驗結果:

鐵離子呈藍色;細胞核呈紅色。

實驗技巧: 

(1)普魯士藍染液要現配現用。 

(2)切片染色前用蒸餾水洗干凈,防止自來水中的鐵離子在染色中反應,造成假陽性。

普魯士藍染色樣片參考:


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