規格： 切片 β-半乳糖苷酶是一種常用的報告基因分子，通過原位染色，在普通的光學顯微鏡下就可以用于檢測到β-半乳糖苷酶的表達。 

實驗步驟： 

1.用 2 mL D-PBSA 液洗滌細胞（如在 6 孔培養板上）。 

2.用 1 mL 固定液于室溫下固定細胞 5 min。 

3.用 2 mL D-PBSA 洗滌細胞 2 次。 

4.將 1 mL 底物/染色液加入到每個培養孔內，37℃ 孵育 2 h。 

5.用 2 mL D-PBSA 液沖洗每孔細胞，在倒置顯微鏡下觀察細胞，計數藍染（β-gal 陽性）細胞。 

6. 培養板的儲存。在每孔加 1 mL 含 10% 甲醛的緩沖鹽溶液，室溫下固定 10 min，然后用緩沖鹽溶液洗滌細胞，4℃ 儲存 緩沖鹽溶液。 

結果展示：

被β半乳糖苷酶法染色的衰老細胞 

注意事項： 

1. β-Gal Fixative有一定的腐蝕性和氣味，操作時請注意防護。 

2.β-半乳糖苷酶染色反應依賴于特定的pH條件，不能在二氧化碳培養箱中進行染色反應。用于細胞培養的二氧化碳培養箱 中較高濃度的二氧化碳會影響染色工作液的pH值，而導致染色失敗。 

3. 配制染色工作液時需使用聚丙烯（polypropylene）容器或玻璃容器，不宜使用聚苯乙烯（polystyrene）容器。但染色時 可以在聚苯乙烯（polystyrene）容器中進行，例如普通的6孔板就可以用作染色的容器。

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